Ⅰ 怎樣用電泳法測定未知DNA片段的分子量
用已知的DNA Marker和未知的DNA一起跑電泳,看未知的DNA條帶位置即可。看它接近於哪一條已知的DNA Marker 條帶,即可判斷大致的DNA分子量。
電泳緩沖液的另一個作用是使溶液具有一定的導電性,以利於DNA分子的遷移,例如,一般電泳緩沖液中應含有0.01-0.04mol/L的Na+離子,Na+離子的濃度太低時電泳速度變慢;太高時就會造成過大的電流使膠發熱甚至熔化。
(1)如何確認未知的緩沖液可以使用擴展閱讀:
紙電泳法:
(1) 電泳緩沖液 枸櫞酸鹽緩沖液(pH3.0)。取枸櫞酸 (C6H8O7·H2O)39.04g與枸櫞酸鈉(C6H5Na3O7·2H2O4.12g,加水4000ml,使溶解。
(2) 濾紙 取色譜濾紙置1mol/L甲酸溶液中浸泡過夜,次日取出,用水漂洗至洗液的pH值不低於4,置60℃烘箱烘乾,備用。可按需要裁成長27cm、寬18cm的濾紙,或根據電泳室的大小裁剪,並在距長度方向一端5~8cm處劃一起始線,每隔2.5~3cm處做一記號備點樣用。